背景介紹
污染物之間的毒性效應往往具有加和、協同、拮抗等作用,常規理化參數監測項目單一,難以評估。通過生物綜合毒性檢測能監測未被檢測的污染物的潛在的毒性效應,可以有效反應污染物對人體健康、環境生態系統的綜合影響。因此,在供水安全、預警突發環境污染事件場景和公共衛生事件中,生物毒性在水質安全保衛中發揮著重要的作用。
急性毒性檢測根據選取受試生物不同,分為魚類急性毒性測試法、浮游生物急性毒性測試法和微生物急性毒性測試法。前 2 種方法工作量大,測試時間長,不適于大批量水樣的快速檢測,發光細菌法因其檢測速度快、自動化程度高、人為錯誤少等優點得到廣泛應用。早在 20世紀 70 年代末,國外科學家就已從海魚體表分離出了發光細菌用于檢測水體的生物毒性,90年代德國與歐盟均頒布了應用發光細菌檢測水質急性毒性的標準方法,而我國于 1995 年頒布實施了《水質 急性毒性的測定 發光細菌法》(GB/T15441-1995),現該法已成為我國水質急性毒性快速檢測的常用方法。通過建立污染水體作用劑量與毒性效應之間的關系,可以將損害程度量化,直觀地反映污染水體對生物種群的影響,提供環境污染預警,更好地指導環境污染防治。因而水質急性毒性檢測已經逐步成為評價水質污染地重要手段之一。
浙江省某環監站擔任著省內環境安全和保證供水系統安全的重任,需要對水質綜合毒性指標能進行快速檢測的能力,經過與國家標準方法的對比,認為 TX1315 便攜式生物毒性分析儀可以勝任毒性檢測的需求,并且可以針對突發事故進行現場檢測。
實驗操作
復蘇菌
a. 1mL 冷的 2.5% NaCl 加入到凍干粉中;
b. 冰箱中復蘇 30 分鐘。
配置測試樣品
a. Hg 標液 1000mg/L 稀釋到 20mg/L;
b. Hg 標液 20mg/L 稀釋到 2mg/L;
c. Hg 標液 2mg/L 稀釋到測試用不同梯度濃度。
測試
a. 加樣:2mL Hg 標液/2mL 3% NaCl+ 10ul 發光菌液;
b. 反應 15 分鐘;
c. 每個濃度三個平行樣,每個測試管配一個參考管。
檢測結果
根據《水質 急性毒性的測定 發光細菌法》(GB/T15441-1995)標準要求,使用明亮發光桿菌作為受試菌種,檢測汞的不同當量濃度標準液的 RLU 值和相對發光度,結果如下圖所示。
總結
發光細菌法測定水質急性毒性可選用參比毒物來表征,也可選用抑制率來表示。我國國標中采用HgCl?作為參比毒物,在檢測樣品的同時,制作一系列濃度的HgCl?與發光強度關系曲線。以樣品的相對發光強度從標準曲線上查得相應的HgCl?濃度,則該樣品的毒性即相當于該濃度HgCl?的毒性。
發光細菌發能較好的反映水質的綜合毒性,但是不能獲得具體某一類型毒性物質的毒性信息。
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