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庖丁解牛!讓我們從原理上重新審視分光光度計!

更新時間:2021-12-31      點擊次數(shù):1408

DR6000.png

哈希 DR6000分光光度計

原理
    物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比,其數(shù)學(xué)表示式如下:
                                                               A= abc
式中: A—吸光度; a—摩爾吸光系數(shù); b—吸收介質(zhì)的厚度; c—吸光物質(zhì)的濃度。

光學(xué)系統(tǒng)原理
    由光源鎢燈和氛燈發(fā)出的復(fù)合光經(jīng)由步進(jìn)電機控制帶動反光鏡M1,反射通過入射狹縫,并進(jìn)入單色器中,光柵衍射出的單色光經(jīng)準(zhǔn)直鏡M2調(diào)焦,會聚通過出射狹縫,光束到達(dá)斬光器時,一段時間內(nèi)的光射成為參比光路,另一段時間內(nèi)的光透射成為樣品光路。后兩光交替地照射在檢測器(光電倍增管)(圖2)。

分光——光學(xué)系統(tǒng).png

電器系統(tǒng)原理
光電倍增管檢測出的信號經(jīng)由前置放大器,驅(qū)動卡傳遞給微機控制器,由微機控制器推動驅(qū)動卡居中協(xié)調(diào)各部分(圖3)。

分光——電氣原理.png

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